A1BG Double Nickase Plasmid (h): sc-403087-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das A1BG Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- A1BG Double-Nickase-Plasmid (h) und A1BG Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf A1BG abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: A1BG: sc-374415
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
A1BG Double Nickase Plasmid (h) | sc-403087-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
A1BG Double Nickase Plasmid (h2) | sc-403087-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Alpha-1B-Glykoprotein (A1BG) kodiert ein sezerniertes Plasma-Glykoprotein aus der Immunglobulin-Superfamilie, das hauptsächlich in der Leber produziert wird und im Blutkreislauf sowie in extrazellulären Flüssigkeiten nachweisbar ist. Obwohl seine genaue molekulare Funktion bislang nicht vollständig geklärt ist, wird A1BG häufig im Kontext extrazellulärer Protein-Interaktionsnetzwerke, des Glykoprotein-Umsatzes sowie systemischer entzündlicher und metabolischer Zustände untersucht, die das Plasma-Proteom beeinflussen. Unterschiede in der A1BG-Menge wurden in zahlreichen krankheitsassoziierten Proteom-Profilen beschrieben, was seinen Einsatz als biomarker-assoziiertes Ziel in translationalen Entdeckungs-Workflows unterstützt. In Zell- und Gewebemodellen kann die Untersuchung von A1BG dabei helfen, die Dynamik sezernierter Proteine mit Signalwegen zu verknüpfen, die Wirtsantwort, Gewebeumbau und Signalgebung im Mikromilieu steuern.
A1BG Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des A1BG-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von A1BG abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die A1BG-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit A1BG-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.