2X Laemmli Sample Buffer

2X Laemmli Sample Buffer ist ein weit verbreitetes Reagenz in der biochemischen und molekularbiologischen Forschung, insbesondere für die Vorbereitung von Proteinproben für die Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE). Der nach seinem Entwickler Ulrich Laemmli benannte Puffer enthält eine Kombination aus Tris-HCl, SDS, Glycerin, β-Mercaptoethanol (oder DTT) und dem Farbstoff Bromphenolblau. Die Zusammensetzung des Puffers sorgt dafür, dass die Proteine denaturiert, reduziert und gleichmäßig geladen werden, was ihre Trennung nach Molekulargewicht während der Elektrophorese erleichtert. In der Forschung spielt der 2X Laemmli Sample Buffer eine entscheidende Rolle bei der Proteinanalyse. Die SDS-Komponente bindet an die Proteine und verleiht ihnen eine negative Ladung, die proportional zu ihrer Länge ist, was die Trennung der Proteine ausschließlich nach ihrer Größe ermöglicht, wenn sie einem elektrischen Feld ausgesetzt werden. Das Reduktionsmittel, β-Mercaptoethanol oder DTT, bricht Disulfidbindungen auf, so dass die Proteine vollständig denaturiert werden und einzelne Polypeptide genau aufgelöst werden können. Glycerin erhöht die Dichte der Probe und sorgt dafür, dass sie in die Vertiefungen des Gels sinkt, während Bromphenolblau als Tracking-Farbstoff dient, um den Fortschritt der Elektrophorese zu überwachen. Forscher verlassen sich auf 2X Laemmli Sample Buffer, um Proben für verschiedene nachgelagerte Anwendungen vorzubereiten, z. B. Western Blotting, Massenspektrometrie und andere proteomische Analysen. Seine konsistente und zuverlässige Probenvorbereitung hilft bei der detaillierten Charakterisierung der Proteinexpression, der posttranslationalen Modifikationen und der Protein-Protein-Wechselwirkungen, was ihn für die Untersuchung zellulärer Prozesse und biochemischer Vorgänge unverzichtbar macht.