Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
γB-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-419829
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- γB-crystallin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico γB-crystallin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:γB-crystallin Anticorpo (D-5): sc-377056
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
γB-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-419829 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Crygb codifica a γB-cristalina, uma cristalina estrutural do cristalino do olho dos vertebrados, altamente expressa, que contribui para o índice de refração e para a transparência do cristalino a longo prazo. Como membro da superfamília das βγ-cristalinas, a γB-cristalina participa na densa rede proteica que mantém a arquitetura das células das fibras do cristalino e resiste à agregação sob stresse oxidativo e outros stressores proteotóxicos. A perturbação da homeostase das cristalinas está associada a solubilidade proteica alterada, organização deficiente das células das fibras e fenótipos de dispersão de luz relevantes para processos do tipo catarata. Assim, o Crygb de rato é um ponto de entrada genético útil para estudar o desenvolvimento do cristalino, vias de proteostase e mecanismos de estabilidade e comportamento de fase das cristalinas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO γB-crystallin (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Crygb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Crygb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Crygb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína γB-crystallin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Crygb para a investigação da sinalização de γB-crystallin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Crygb críticos para a função γB-crystallin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Crygb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo γB-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo γB-crystallin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Crygb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo γB-crystallin Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR γB-crystallin (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Crygb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Crygb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.