Plásmido Doble Nickase (m) β ig-h3: sc-423369-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)β ig-h3 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa β ig-h3 (m) y el plásmido de doble nickasa β ig-h3 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Tgfbi. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) β ig-h3 | sc-423369-NIC | 20 µg | $410.00 |
Tgfbi codifica β ig-h3 (TGFBI), una proteína secretada de la matriz extracelular inducida por la señalización de TGF-β que modula la adhesión célula–matriz, la migración y la remodelación tisular mediante interacciones con integrinas y componentes estructurales de la matriz. En sistemas murinos, β ig-h3 contribuye a la organización de la matriz extracelular, a procesos asociados a la reparación de heridas y a la regulación del comportamiento de células epiteliales y estromales, vinculándose con vías como la señalización de adhesiones focales y respuestas fibróticas impulsadas por TGF-β. La expresión alterada de TGFBI o la deposición de matriz se estudian con frecuencia en contextos de remodelación patológica, incluidos fenotipos tipo fibrosis y cambios en el microambiente tumoral, donde la composición de la MEC puede influir en la invasión y el tráfico de células inmunitarias. Estas características hacen de Tgfbi una diana útil para analizar cómo las proteínas de la MEC reguladas por TGF-β modelan la arquitectura tisular y la mecanobiología.
β ig-h3 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Tgfbi en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Tgfbi. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Tgfbi. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Tgfbi alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.