Plasmide Double Nickase (h) β Enolase: sc-400843-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) β Enolase correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide β Enolase Double Nickase (h) et le plasmide β Enolase Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant ENO3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: β Enolase Antibody (XX-10): sc-100811
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) β Enolase | sc-400843-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) β Enolase | sc-400843-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ENO3 code la β-énolase humaine (ENO3), une enzyme glycolytique enrichie dans le muscle qui catalyse la conversion du 2‑phosphoglycérate en phosphoénolpyruvate, soutenant la production d’ATP dans les tissus à forte demande énergétique. Au-delà de la glycolyse, les isoformes d’énolase contribuent au remodelage métabolique et aux réponses au stress cellulaire via des liens avec la signalisation de l’hypoxie et une régulation plus large des flux de carbone. Une expression ou une activité altérée d’ENO3 a été associée à des pathologies du muscle squelettique et à des phénotypes myopathiques, et fait l’objet d’études dans des contextes de dysfonctionnement métabolique et de remodelage tissulaire. En tant que marqueur de l’état métabolique musculaire, ENO3 est fréquemment utilisé pour explorer les changements du métabolisme énergétique, de la différenciation et de la protéostasie dans des modèles cellulaires humains.
β Enolase Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ENO3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ENO3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ENO3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ENO3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.