O ZNF324B pode iniciar uma cascata de eventos intracelulares que conduzem à sua ativação funcional. O 12-miristato 13-acetato de forbol (PMA) e o 1,2-Dioctanoil-sn-glicerol (DiC8), ambos mimetizam o diacilglicerol (DAG) e activam diretamente a proteína quinase C (PKC). Após a ativação, a PKC pode fosforilar o ZNF324B, que é um passo crítico para a sua ativação funcional. Do mesmo modo, a forskolina e o dibutiril-AMP, ao aumentarem os níveis intracelulares de AMPc, reforçam a atividade da proteína quinase A (PKA). A PKA pode então fosforilar o ZNF324B, levando à sua ativação. A ionomicina, através da sua ação de aumento dos níveis de cálcio intracelular, ativa indiretamente a calcineurina, uma fosfatase que pode desfosforilar sítios reguladores específicos do ZNF324B, activando-o assim.
O Fator de Crescimento Epidérmico (EGF) inicia uma cascata de sinalização activando o recetor EGF, o que leva à ativação da via MAPK/ERK. Esta via pode fosforilar o ZNF324B, activando-o assim. A ligação da insulina ao seu recetor desencadeia a via de sinalização PI3K/Akt, que é conhecida por fosforilar e ativar várias proteínas, incluindo o ZNF324B. A anisomicina, ao ativar proteínas cinases activadas pelo stress, como a JNK, também promove a fosforilação e consequente ativação do ZNF324B. Do mesmo modo, o ácido ocadaico e a calicilina A, ambos inibidores das proteínas fosfatases PP1 e PP2A, conduzem a uma acumulação de proteínas fosforiladas, incluindo o ZNF324B, resultando na sua ativação devido a uma diminuição da atividade de desfosforilação. O isoproterenol, através da ativação dos receptores beta-adrenérgicos, aumenta o AMPc nas células, que ativa a PKA e pode levar à ativação do ZNF324B. Por último, a briostatina 1 liga-se à PKC e ativa-a, que é um elemento-chave na fosforilação de proteínas, incluindo potencialmente o ZNF324B, e, por conseguinte, na sua ativação.
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