A forskolina serve como um agente arquetípico que aumenta o AMPc intracelular, catalisando assim diretamente a ativação da proteína quinase A. Esta quinase, por sua vez, tem como alvo as proteínas para fosforilação, um interrutor molecular que pode ativar o C17orf66. Complementando esta ação, o IBMX assegura que os níveis de AMPc permanecem elevados, impedindo a sua degradação, sustentando assim o sinal fosforilativo e assegurando a manutenção do estado de ativação do C17orf66. O PMA, um potente ativador da proteína quinase C, desencadeia uma cascata de fosforilação distinta. Esta cascata pode orquestrar uma série de modificações no interior da célula, culminando na fosforilação e ativação do C17orf66. Simultaneamente, vários compostos, incluindo o ácido ocadaico, a cantharidina e a calicilina A, actuam como sentinelas inibindo enzimas fosfatases como a PP1 e a PP2A.
O LY294002 e o U0126 inibem estrategicamente a PI3K e a MEK, respetivamente. Estes inibidores, ao alterarem o equilíbrio das redes de sinalização celular, têm o potencial de aumentar indiretamente o estado de ativação do C17orf66. O SB203580 acrescenta outra camada de complexidade ao visar especificamente a p38 MAP quinase, uma enzima cuja inibição pode conduzir a vias de sinalização alternativas que podem cruzar-se com o processo de ativação do C17orf66. O galato de epigalocatequina, amplamente reconhecido pelos seus amplos efeitos reguladores nas vias de sinalização, e a anisomicina, um ativador de proteínas quinases activadas pelo stress, exemplificam os diversos mecanismos através dos quais a ativação do C17orf66 pode ser conseguida indiretamente. O fluoreto de sódio assegura a robustez do estado de fosforilação na célula através da inibição das serina/treonina fosfatases, promovendo assim um ambiente que favorece a ativação do C17orf66.
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