Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
ZWINT Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h): sc-405718
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZWINT Il plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) è un pool di plasmidi, ciascuno dei quali codifica la nucleasi Cas9 e un RNA guida (gRNA) specifico per il bersaglio di 20 nt, progettato per la massima efficienza di knockout utilizzando sequenze derivate dalla libreria GeCKO v2
- Le sequenze gRNA indirizzano Cas9 a indurre rotture a doppio filamento (DSB) sito-specifiche nel locus genomico ZWINT, con conseguente knockout genico tramite giunzione non omologa (NHEJ)
- I geni di resistenza alla puromicina e RFP sono fiancheggiati da siti LoxP, consentendo la rimozione dei marcatori di selezione tramite la ricombinasi Cre (Cre Vector: sc-418923) dopo aver stabilito linee cellulari knockout stabili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: ZWINT Antibody (G-12): sc-166730
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZWINT Plasmide KO CRISPR/Cas9 (h) | sc-405718 | 20 µg | $397.00 |
Panoramica
ZWINT (proteina del cinetocore che interagisce con ZW10) è un componente conservato del cinetocore esterno che favorisce un attacco stabile ai microtubuli e una corretta segregazione dei cromosomi durante la mitosi. Interagisce con il complesso ZW10/RZZ e contribuisce alla segnalazione del checkpoint di assemblaggio del fuso, accoppiando le dinamiche cinetocore–microtubulo alla progressione del ciclo cellulare. Un’alterata espressione o funzione di ZWINT è stata associata a instabilità cromosomica e a fenotipi proliferativi osservati in molteplici contesti tumorali, rendendola rilevante per studi su aneuploidia e mantenimento del genoma. In quanto regolatore mitotico, ZWINT è spesso analizzata in vie che collegano il controllo del checkpoint, l’architettura del cinetocore e le risposte allo stress mitotico.
Il plasmide CRISPR/Cas9 KO ZWINT (h) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene ZWINT in linee cellulari human. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del ZWINT insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.
Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto ZWINT a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina ZWINT.
Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di ZWINT per lo studio della segnalazione di ZWINT, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.
Caratteristiche principali
- sgRNA mirati agli esoni ZWINT critici per la funzione di ZWINT
Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di ZWINT per migliorare l'efficienza del knockout
Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione
Varianti di progettazione
CRISPR +/- HDR
- Gli gRNA codificati dal ZWINT CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h) e dal ZWINT CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus ZWINT. Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
I costrutti donatori HDR codificati dal ZWINT Plasmide HDR (h) e il plasmide HDR ZWINT (h2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia ZWINT per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio ZWINT definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.