非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ZO-1 抗体 (R40. 76): sc-33725. 小鼠肺组织提取物中 ZO-1 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
ZO-1双切口酶质粒(m): sc-423407-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- ZO-1 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- ZO-1双切酶质粒（m）和ZO-1双切酶质粒（m2）编码针对Tjp1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：ZO-1: sc-33725，通过WB, IF或者IHC分析
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| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
ZO-1双切口酶质粒(m) | sc-423407-NIC | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Tjp1 基因编码紧密连接支架蛋白 ZO-1（TJP1）。ZO-1 属于膜相关鸟苷酸激酶（MAGUK）家族成员，可将 claudin 和 occludin 连接到细胞皮质肌动蛋白细胞骨架，从而组织顶端–基底极性并维持旁细胞屏障功能。ZO-1 参与紧密连接的组装与维持，整合由 Rho GTPase 调控的细胞骨架动态以及连接处机械信号转导所产生的信号，并可影响依赖细胞接触的信号通路，以协调上皮组织结构。ZO-1 的定位或表达发生改变，常被用作上皮和内皮屏障功能障碍模型中紧密连接完整性的读出指标。在小鼠体系中，对 Tjp1 进行扰动有助于开展通透性、炎症相关的屏障重塑，以及需要精确连接结构的发育过程等方面的机制研究。
ZO-1 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Tjp1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Tjp1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Tjp1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Tjp1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。