ZnT-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403451

概要

SLC30A10 は ZnT-10 をコードしており、ZnT-10 は金属トランスポーターである SLC30 ファミリーの一員です。細胞内の二価カチオン恒常性を調節し、とりわけマンガンの細胞外排出および細胞内区画への隔離において重要な役割を担います。ZnT-10 は細胞内マンガン量を制御することで、メタロタンパク質の機能、酸化ストレス応答、ならびに金属依存性酵素活性に影響を受ける下流のシグナル伝達過程に作用します。SLC30A10 の調節異常は、異常なマンガン蓄積や金属ハンドリングの変化と関連し、肝臓および神経系の生理機能を乱し得ます。そのため ZnT-10 は、関連するヒト細胞モデルにおいて、金属輸送・ミトコンドリア機能・細胞ストレス適応を結び付ける経路の中で研究されています。

ZnT-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるSLC30A10遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、SLC30A10内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、SLC30A10のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、ZnT-10タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、ZnT-10シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、SLC30A10欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• ZnT-10の機能に不可欠なSLC30A10エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、SLC30A10ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• ZnT-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびZnT-10 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、SLC30A10遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  ZnT-10 HDRプラスミド（h）および ZnT-10 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはSLC30A10ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のSLC30A10標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。