Plasmide Double Nickase (h) ZNF263: sc-411418-NIC

ZNF263 code un facteur de transcription à doigts de zinc C2H2 contenant un domaine KRAB, qui se lie à des motifs spécifiques de l’ADN pour réguler des programmes d’expression génique associés à l’organisation de la chromatine et à la répression transcriptionnelle. Par ses interactions avec la machinerie corépresseur associée au KRAB et des modificateurs épigénétiques, ZNF263 contribue au contrôle de l’activité des promoteurs et des enhancers, influençant la progression du cycle cellulaire, la différenciation et la stabilité du génome. Une activité altérée de ZNF263 ou une expression dérégulée a été associée au remodelage transcriptionnel observé dans divers contextes pathologiques, notamment des voies liées au cancer et des anomalies de la régulation du développement. En tant que régulateur spécifique de séquence, ZNF263 est fréquemment étudié pour cartographier les réseaux régulateurs, identifier des cibles génomiques directes et analyser les mécanismes de contrôle épigénétique.

ZNF263 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus ZNF263 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de ZNF263. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de ZNF263. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de ZNF263.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.