ZIP9 더블 틈내기효소 플라스미드 (m): sc-435885-NIC

Slc39a9는 ZIP 계열 금속 이온 수송체의 일원인 ZIP9(SLC39A9)를 암호화하며, 아연 유입과 세포 내 구획별 분포를 조절해 세포의 아연 항상성 유지에 기여합니다. ZIP9는 세포 내 Zn²⁺의 이용 가능성을 형성함으로써 아연 의존성 효소와 전사 프로그램에 영향을 미치며, 금속 균형을 막 수송, 신호전달, 스트레스 반응과 같은 과정과 연결합니다. 아연 수송의 조절 이상은 면역 기능, 대사 조절, 증식 신호의 변화와 폭넓게 연관되어 있어 Slc39a9는 금속 의존성 경로의 기전 연구에 유용한 표적입니다. 마우스 시스템에서 ZIP9를 교란하면 관련 세포 유형과 조직에서 아연 반응성 네트워크와 그 하위 표현형을 분석하는 데 도움이 됩니다.

ZIP9 더블 니카제 플라스미드(m)는 mouse 세포주 내 Slc39a9 유전자좌의 고특이성 편집을 위해 설계된 쌍을 이루는 플라스미드로 구성됩니다. 각 플라스미드는 Cas9 D10A 니카아제와 Slc39a9 내의 반대 DNA 가닥을 표적으로 하는 고유한 sgRNA를 발현합니다. 반대 DNA 가닥의 인접 부위로 유도될 때, 두 니카아제는 서로 어긋난 단일 가닥 절단 부위를 생성하며, 이는 함께 엇갈린 이중 가닥 절단을 유발하여 두 가이드의 조화된 표적 활성을 필요로 합니다. 이렇게 생성된 DNA 절단은 내인성 세포 복구 경로, 특히 비동형 말단 결합(NHEJ)을 통해 해결되며, 이는 Slc39a9의 기능을 방해하는 삽입 또는 결실을 초래한다. 표적 부위에서 이중 sgRNA 결합을 요구함으로써, 이중 니킹 접근법은 편집 특이성을 향상시키고 표적 정밀도에 대한 추가적인 제어가 필요한 응용을 위한 보완적인 CRISPR 전략을 제공한다.

편집된 세포를 효율적으로 식별할 수 있도록, 한 플라스미드는 형광 시각화를 위한 GFP를 발현하며, 다른 플라스미드는 항생제 선별을 위한 푸로마이신 내성 유전자를 포함하고 있습니다. 이러한 기능들은 공동 형질 도입된 세포 집단의 효율적인 농축을 지원하며, Slc39a9 기능이 손상된 클론의 검증을 단순화합니다.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.