ZIP4 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-428200-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ZIP4O plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ZIP4 (m) e o Plasmídeo Double Nickase ZIP4 (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Slc39a4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ZIP4 Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-428200-NIC | 20 µg | $410.00 |
O gene Slc39a4 de camundongo codifica o ZIP4, um importador de zinco na membrana plasmática que regula a captação celular de zinco e, assim, sustenta a atividade de enzimas dependentes de zinco, a função de fatores de transcrição e a homeostase redox. O ZIP4 contribui para a absorção de nutrientes e para programas de diferenciação no epitélio, conectando a disponibilidade de zinco à sinalização proliferativa e a vias de resposta ao estresse. A atividade desregulada do ZIP4 perturba a homeostase do zinco e pode alterar a função de barreira e a sinalização inflamatória, tornando o Slc39a4 um ponto útil para estudar o transporte de íons metálicos na biologia metabólica e epitelial. Como o zinco é um cofator crítico para muitas proteínas de ligação ao DNA e enzimas de reparo, o fluxo de zinco dependente de ZIP4 também pode influenciar processos de manutenção do genoma relevantes para fenótipos de doença em sistemas modelo.
ZIP4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Slc39a4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Slc39a4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Slc39a4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Slc39a4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.