ZC3H4 Plasmide Double Nickase (h): sc-411693-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- ZC3H4 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il ZC3H4 Double Nickase Plasmid (h) e il ZC3H4 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira ZC3H4. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
ZC3H4 Plasmide Double Nickase (h) | sc-411693-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ZC3H4 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-411693-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ZC3H4 codifica una proteina legante l’RNA con dito di zinco di tipo CCCH, implicata nel metabolismo dell’RNA nucleare e nel controllo della trascrizione. Le evidenze attuali collegano ZC3H4 alla regolazione della terminazione della trascrizione da parte dell’RNA polimerasi II e alla processazione dei trascritti nascenti, influenzando i programmi di espressione genica e la sorveglianza dell’RNA nucleare. Modulando il destino dell’RNA all’interfaccia cromatina–RNA, ZC3H4 può influenzare vie che controllano le transizioni di stato cellulare, le risposte allo stress e la proliferazione. Un’alterata regolazione della terminazione trascrizionale e della processazione dell’RNA è frequentemente osservata nel cancro e in altri disturbi dell’espressione genica, rendendo ZC3H4 un bersaglio utile per studi meccanicistici di questi processi.
ZC3H4 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus ZC3H4 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di ZC3H4. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di ZC3H4. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con ZC3H4 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.