YAP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400040-LAC
- alvos específicos: human
- 200 µl de alto titulo de partículas de ativação lentiviral CRISPR/dCas9 prontas para a transdução of transduction-ready
- YAP as Partículas de Ativação Lentiviral (h) agem como um sistema de ativação de transcrição sinergética ao mediador de ativação (SAM, que foi criado para regular positivamente com especificidade e eficiência a expressão genética via transdução celular com lentivirus
- YAP As partículas de ativação lentivirais (h) contem os seguintes elementos de ativação SAM:uma nuclease Cas9 (dCas9) desativada (D10A and N863A) ligadas a um domínio de transactivacao VP64, uma proteína de fusão MS2-p65-HSF1 e um alvo-especifico de RNA guia de 20 nt guia RNA. Ainda, as partículas contem genes de resistência a blasticidina, higromicina e puromicina
- Durante a transdução, o complexo SAM se liga a uma região especifica de aproximadamente 200-250 nt upstream da região de inicia da transcrição e assegura um recrutamento robusto de fatores de transcrição para uma eficiente ativação genética
- Os gRNAs codificados pelo YAP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h) e pelo YAP Plasmídeo de Ativação Lentiviral (h2) têm como alvo regiões reguladoras distintas do promotor YAP1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo: YAP Anticorpo (G-6): sc-376830
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
YAP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h) | sc-400040-LAC | 200 µl | $455.00 | |||
YAP Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h2) | sc-400040-LAC-2 | 200 µl | $455.00 |
O gene YAP1 humano codifica a YAP, um coativador de transcrição que atua como um efetor nuclear central da via de sinalização Hippo para regular a proliferação celular, a sobrevivência e o controlo do tamanho dos órgãos. A atividade de YAP é regulada pela sua retenção no citoplasma dependente de fosforilação e pelo seu transporte entre o citoplasma e o núcleo, integrando estímulos mecânicos, densidade celular e sinalização por GPCR para modular programas de expressão génica mediados por TEAD. A desregulação da sinalização YAP1/YAP tem sido implicada em alterações no controlo do crescimento tecidular, em programas epitélio–mesênquima e em mudanças em propriedades semelhantes às de células estaminais, tornando-a um alvo amplamente utilizado para estudar redes de regulação do crescimento. Na investigação biomédica, a YAP é frequentemente estudada pelos seus papéis na mecanotransdução, na inibição por contacto e na reprogramação transcricional em diversos contextos celulares.
As Partículas de Ativação Lentivirais YAP (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de YAP1 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.
As Partículas de Ativação Lentivirais YAP (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição YAP1, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de YAP. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo YAP1 e a arquitetura reguladora.
O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.