Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
YAP1 Antibody (H-9): sc-271134. Western blot analysis of YAP expression in Hep G2 (A), U-2 OS (B), NIH/3T3 (C), C6 (D) and AT3B-1 (E) whole cell lysates.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
YAP双切口酶质粒(m): sc-423742-NIC
- 针对种属：mouse
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- YAP 双切口酶质粒（m）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- YAP双切酶质粒（m）和YAP双切酶质粒（m2）编码针对Yap1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：YAP: sc-398182，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
YAP双切口酶质粒(m) | sc-423742-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
YAP双切口酶质粒(m2) | sc-423742-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Yap1 基因编码转录共激活因子 YAP，它是 Hippo 信号通路的核心效应分子，可将细胞–细胞接触和机械性线索与基因表达程序相耦联，从而调控细胞增殖、生存以及器官大小。YAP 在细胞质与细胞核之间的穿梭受磷酸化依赖的滞留与降解所调控，使其能够整合 GPCR 信号、细胞骨架张力以及细胞外基质刚度等信息。YAP 活性失调与组织生长异常、纤维化相关的重塑以及致癌性转录程序有关，这些作用常通过其与 TEAD 因子的协同以及与 Wnt/β-连环蛋白和 TGF‑β 通路的串扰来实现。因此，Yap1 在小鼠模型中被广泛用于研究上皮稳态、干/祖细胞行为以及由机械转导驱动的表型。
YAP 双切酶质粒（m）由一对匹配的质粒组成，专为在 mouse 细胞系中对 Yap1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Yap1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏Yap1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了Yap1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。