Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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WSTF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404237
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WSTF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico WSTF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:WSTF Anticorpo (G-5): sc-514287
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WSTF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-404237 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
BAZ1B codifica o fator de transcrição da síndrome de Williams (WSTF), uma proteína reguladora associada à cromatina que atua como subunidade central dos complexos de remodelamento WICH e B-WICH. O WSTF coordena o remodelamento de nucleossomos com a replicação e o reparo do DNA, contribuindo para a estabilidade do genoma por meio da regulação de respostas ao estresse replicativo e da recuperação de forquilhas de replicação estagnadas. Também apresenta uma atividade atípica de tirosina quinase, implicada em sinalização dependente de fosforilação na cromatina, conectando o controle transcricional a vias responsivas a danos no DNA. Alterações na dosagem de BAZ1B e programas de cromatina desregulados mediados por WSTF têm sido associados a fenótipos do neurodesenvolvimento e a defeitos transcricionais e de reparo relevantes para o câncer, sustentando seu estudo em regulação epigenética e biologia de doenças.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO WSTF (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene BAZ1B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do BAZ1B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do BAZ1B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína WSTF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de BAZ1B para a investigação da sinalização de WSTF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) BAZ1B críticos para a função WSTF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos BAZ1B para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo WSTF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo WSTF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus BAZ1B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo WSTF Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR WSTF (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia BAZ1B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo BAZ1B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.