Plásmido Doble Nickase (h) Wnt-8b: sc-405077-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)Wnt-8b consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Wnt-8b (h) y el plásmido de doble nickasa Wnt-8b (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a WNT8B. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) Wnt-8b | sc-405077-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) Wnt-8b | sc-405077-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
WNT8B codifica la glucoproteína secretada Wnt-8b, un ligando que inicia la señalización canónica Wnt/β-catenina a través de los correceptores Frizzled y LRP5/6 para regular la especificación del destino celular, la proliferación y el patrónamiento tisular. La actividad de Wnt-8b contribuye a los gradientes de morfógenos y a programas transcripcionales mediados por TCF/LEF, influyendo en procesos del neurodesarrollo, incluido el patrónamiento del prosencéfalo y del mesencéfalo. La expresión desregulada de WNT8B o los desequilibrios de la vía se han asociado con estados de diferenciación alterados y señalización de crecimiento aberrante observados en diversos contextos patológicos, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en la biología impulsada por Wnt. Como ligando secretado de la vía, Wnt-8b se estudia con frecuencia por sus efectos sobre la señalización paracrina, los fenotipos tipo célula madre y el diálogo cruzado con las salidas de señalización de MAPK y PI3K/AKT.
Wnt-8b El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus WNT8B en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de WNT8B. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de WNT8B. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con WNT8B alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.