Wnt-7b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423722
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Wnt-7b O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Wnt-7b, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Wnt-7b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423722 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Wnt7b codifica a glicoproteína secretada Wnt-7b, um ligante que ativa a sinalização Wnt canônica e não canônica para regular decisões de destino celular, proliferação, polaridade e padronização tecidual durante a embriogênese e a homeostase pós-natal em camundongos. A interação de Wnt-7b com receptores Frizzled/LRP influencia a transcrição dependente de β-catenina, bem como vias de polaridade celular planar e vias ligadas a Ca²⁺, moldando interações epitélio–mesênquima e a morfogênese de órgãos. A atividade desregulada de Wnt7b tem sido associada a programas de desenvolvimento aberrantes e a processos de remodelamento que se cruzam com a sinalização oncogênica, fibrose e microambientes inflamatórios em múltiplos contextos teciduais. Como nó de via, Wnt-7b é frequentemente estudada por seus papéis no comportamento de células-tronco/progenitoras, na biologia vascular e das vias aéreas, e no crosstalk com as vias de sinalização TGF-β, Hedgehog e Notch.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Wnt-7b (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Wnt7b em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Wnt7b, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Wnt7b na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Wnt-7b.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Wnt7b para a investigação da sinalização de Wnt-7b, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Wnt7b críticos para a função Wnt-7b
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Wnt7b para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Wnt-7b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Wnt-7b Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Wnt7b. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Wnt-7b Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Wnt-7b (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Wnt7b para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Wnt7b definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.