Wnt-15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406368

Visão geral

WNT9B codifica a glicoproteína secretada Wnt-15, um ligante que ativa a sinalização Wnt para regular a especificação do destino celular, a proliferação, a polaridade e o padrão de organização dos tecidos durante o desenvolvimento. Por meio de interações com receptores Frizzled e co-receptores, a Wnt-15 pode influenciar programas transcricionais dependentes de β-catenina, bem como vias não canônicas que controlam a dinâmica do citoesqueleto e a migração direcional. A atividade de WNT9B está implicada em gradientes de morfógenos que moldam a organogênese, e a desregulação da sinalização Wnt é amplamente associada a anomalias congênitas e processos oncogênicos. Em modelos celulares humanos, WNT9B oferece um ponto de entrada acessível para dissecar a comunicação cruzada (cross-talk) com a sinalização por fatores de crescimento e com redes transcricionais que governam a diferenciação.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Wnt-15 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene WNT9B em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do WNT9B, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do WNT9B na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Wnt-15.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de WNT9B para a investigação da sinalização de Wnt-15, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) WNT9B críticos para a função Wnt-15
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos WNT9B para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Wnt-15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Wnt-15 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus WNT9B. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Wnt-15 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Wnt-15 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia WNT9B para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo WNT9B definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.