Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Wee 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400701-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Wee 1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Wee 1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Wee 1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para WEE1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Wee 1 Anticorpo (B-11): sc-5285
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Wee 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400701-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Wee 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400701-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene humano **WEE1** codifica a quinase Wee1, um regulador central do checkpoint G2/M que restringe a atividade de **CDK1–ciclina B** por meio de fosforilação inibitória, coordenando assim a conclusão da replicação do DNA com a entrada em mitose. A Wee1 integra sinais das vias de dano ao DNA e de estresse replicativo e coopera com a sinalização **ATR/CHK1** para estabilizar forquilhas de replicação estagnadas e manter a integridade do genoma. Alterações na função ou na expressão de **WEE1** estão associadas à progressão desregulada do ciclo celular, à tolerância ao estresse replicativo e à instabilidade cromossômica, processos frequentemente estudados em biologia do câncer. Como quinase de checkpoint, a Wee1 também é relevante em investigações sobre apoptose, catástrofe mitótica e dependências de vias de reparo do DNA.
Wee 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus WEE1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de WEE1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função WEE1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com WEE1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.