WDR17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-414101

概要

WDR17（WDリピートドメイン17）は、WD40リピートを含むと予測されるタンパク質をコードしており、細胞質および膜関連部位において、多タンパク質複合体の組み立てを支える足場（スキャフォールド）として機能し、制御されたタンパク質間相互作用を担うと考えられています。分子パートナーはまだ十分に解明されていないものの、WDリピートタンパク質は一般に、ユビキチン化などの翻訳後制御機構を協調させることで、細胞内輸送、細胞骨格の構築、シグナル統合に影響を及ぼします。WDR17の発現や遺伝的多様性は、感覚機能や神経発達に関連する表現型の文脈で検討されており、WDリピート型スキャフォールドが、特殊化した細胞構造や恒常性維持経路に関与する可能性と整合的です。これらの特徴により、スキャフォールドタンパク質がシグナル伝達因子の局在や安定性を調節するヒト細胞において、経路ネットワークの結線を解析するための有用な標的としてWDR17が位置付けられます。

WDR17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるWDR17遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、WDR17内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、WDR17のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、WDR17タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、WDR17シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、WDR17欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• WDR17の機能に不可欠なWDR17エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、WDR17ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• WDR17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびWDR17 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、WDR17遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  WDR17 HDRプラスミド（h）および WDR17 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはWDR17ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のWDR17標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。