WAPL Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-432331-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- WAPLO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase WAPL (m) e o Plasmídeo Double Nickase WAPL (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Wapl. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
WAPL Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-432331-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
WAPL Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-432331-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene *Wapl* de camundongo codifica a WAPL, um fator de liberação da coesina que promove a abertura do anel de coesina e regula o tempo de permanência da coesina na cromatina. Ao controlar a dinâmica da coesina, a WAPL influencia a coesão entre cromátides-irmãs, a progressão mitótica, o timing de replicação do DNA e a organização genômica de ordem superior que molda programas transcricionais. A função de WAPL interage com vias que governam a segregação cromossômica, as respostas a dano no DNA e a formação de alças de cromatina, tornando-a um nó-chave na estabilidade do genoma. A desregulação do turnover da coesina e alterações na atividade de WAPL têm sido associadas a aneuploidia, estresse replicativo e fenótipos de desenvolvimento relacionados a coesinopatias, reforçando sua relevância em modelos de biologia de doenças.
WAPL O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Wapl em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Wapl. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Wapl. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Wapl interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.