Date published: 2026-7-14

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VRL-1双切口酶质粒(h): sc-401648-NIC

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • VRL-1 双切口酶质粒(h)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • VRL-1双切酶质粒(h)和VRL-1双切酶质粒(h2)编码针对TRPV2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:VRL-1: sc-514848,通过WB, IF或者IHC分析
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    VRL-1双切口酶质粒(h)

    sc-401648-NIC
    20 µg
    $410.00

    VRL-1双切口酶质粒(h2)

    sc-401648-NIC-2
    20 µg
    $410.00

    人类 TRPV2 编码香草素受体样通道 VRL-1,这是一种非选择性、对 Ca2+ 通透的 TRP 离子通道,能够整合机械刺激、热信号与脂质信号,从而塑造膜兴奋性与细胞内钙动态。VRL-1 的活性会影响与钙依赖性通路相关的过程,包括细胞骨架重塑、囊泡运输,以及下游与 MAPK 和 PI3K 相关的信号传导,这些通路共同协调细胞迁移、分化与应激反应。该通道在免疫细胞与神经细胞背景中研究尤为深入,在这些细胞中,刺激诱发的 Ca2+ 内流可调控炎症程序与感觉信号传递。TRPV2 的表达变化或通道功能异常与多种疾病相关表型有关,包括肿瘤生物学、心肌细胞应激反应以及神经炎症过程,因此支持其作为以通路机制为导向研究中的重要靶点。

    VRL-1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 TRPV2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对TRPV2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏TRPV2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了TRPV2基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。