Plasmide Double Nickase (h) vezatin: sc-418454-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) vezatin correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide vezatin Double Nickase (h) et le plasmide vezatin Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant VEZT. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: vezatin Antibody (B-1): sc-271347
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) vezatin | sc-418454-NIC | 20 µg | $410.00 |
VEZT code la vézatine, un composant transmembranaire des jonctions d’adhérence qui relie le complexe cadhérine–caténine au cytosquelette d’actine et contribue à stabiliser l’adhésion cellule–cellule. La vézatine participe à la polarité épithéliale et à l’architecture tissulaire en soutenant le remodelage des jonctions durant la morphogenèse et en influençant la dynamique du cytosquelette. Une perturbation de l’expression de VEZT ou de sa localisation aux jonctions peut altérer l’intégrité de la barrière et les programmes de migration cellulaire, des processus souvent impliqués dans la dysplasie épithéliale et la progression tumorale. En tant qu’échafaudage associé aux jonctions, la vézatine est aussi pertinente pour l’étude de la mécanotransduction et du dialogue entre voies de signalisation à la membrane plasmique, notamment les voies qui répondent aux changements d’adhésion cellulaire.
vezatin Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus VEZT dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de VEZT. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de VEZT. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de VEZT.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.