Plásmido Doble Nickase (h) VEGF-C: sc-400553-NIC

VEGFC codifica VEGF‑C, un factor de crecimiento secretado que señaliza principalmente a través de VEGFR‑3 (FLT4) y que, tras su maduración proteolítica, también puede interactuar con VEGFR‑2 para regular la migración y supervivencia de las células endoteliales, así como la permeabilidad vascular. VEGF‑C es un impulsor central de la linfangiogénesis y contribuye a la remodelación de los vasos sanguíneos y linfáticos mediante cascadas de señalización de receptores tirosina cinasa, incluidas MAPK/ERK y PI3K/AKT. La actividad desregulada de VEGF‑C se asocia con un desarrollo linfático alterado, un deterioro de la homeostasis de los fluidos tisulares y cambios en el microambiente inflamatorio, y se estudia con frecuencia en contextos de linfangiogénesis asociada a tumores y diseminación metastásica. Estas funciones hacen de VEGF‑C una diana habitual en estudios de biología vascular, tráfico de células inmunitarias y remodelación vascular dependiente de la matriz extracelular.

VEGF-C El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus VEGFC en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de VEGFC. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de VEGFC. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con VEGFC alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.