VDAC3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423663
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- VDAC3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico VDAC3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
VDAC3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423663 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Vdac3 codifica o canal aniônico dependente de voltagem 3 (VDAC3), um poro em barril β na membrana externa mitocondrial que regula a troca de metabólitos e íons entre o citosol e as mitocôndrias. Como parte da família VDAC, o VDAC3 contribui para o acoplamento da fosforilação oxidativa, a manutenção do potencial de membrana mitocondrial e o controle, sensível ao estado redox, da homeostase mitocondrial. Processos associados ao VDAC3 se intersectam com a sinalização de apoptose, o manejo de espécies reativas de oxigênio e vias de controle de qualidade mitocondrial que moldam as respostas celulares ao estresse. Alterações na função do VDAC3 têm sido estudadas em contextos que envolvem disfunção mitocondrial, incluindo desequilíbrio bioenergético e defeitos específicos de tecido ligados a mecanismos de doenças metabólicas e neurodegenerativas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO VDAC3 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Vdac3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Vdac3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Vdac3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína VDAC3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Vdac3 para a investigação da sinalização de VDAC3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Vdac3 críticos para a função VDAC3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Vdac3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo VDAC3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo VDAC3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Vdac3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo VDAC3 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR VDAC3 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Vdac3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Vdac3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.