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VCAM-1慢病毒激活颗粒(h) | sc-400135-LAC | 200 µl | $455.00 |
VCAM1 编码血管细胞黏附分子 1(VCAM-1/CD106),这是一种可诱导的免疫球蛋白超家族受体,表达于被激活的内皮细胞表面,通过与 VLA-4(ITGA4/ITGB1)等整合素结合,介导白细胞的牢固黏附以及跨内皮迁移。其表达可在 NF-κB 及细胞因子驱动的炎症程序作用下被显著上调,从而将血管激活与免疫细胞募集、内皮屏障重塑以及细胞外基质相互作用联系起来。VCAM-1 还参与信号网络,在炎症反应过程中协调细胞骨架动态变化与细胞—细胞黏附。VCAM1 表达失调与慢性炎症和血管功能障碍相关,常在动脉粥样硬化、自身免疫性疾病以及肿瘤相关内皮等研究背景中被重点关注。
VCAM-1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 VCAM1 表达。
VCAM-1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在VCAM1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性VCAM-1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 VCAM1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。