VAX1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-423657

개요

Vax1은 전뇌와 눈의 배아 패터닝에 필수적인 호메오박스 전사인자인 VAX1을 암호화하며, 특히 복측 종뇌(ventral telencephalon)와 시신경줄기(optic stalk) 발달에서 중요한 역할을 합니다. VAX1은 신경 전구세포의 운명 결정, 축삭 유도, 정중선 형성 등을 조율하는 유전자 발현 프로그램을 조절하고, SHH 매개 복측화(ventralization) 및 기타 호메오박스 네트워크와 같은 발달 신호 경로와 통합적으로 작동합니다. 마우스 유전학 연구는 Vax1 기능 이상이 소안구증/무안구증(microphthalmia/anophthalmia)과 시상하부–뇌하수체 영역의 이상을 포함한 선천성 두개안면 및 안구 표현형과 연관됨을 보여줍니다. 이러한 특성 때문에 VAX1은 신경발달 경로와 계통(lineage) 결정에서 전사 조절을 해부학적으로 분석하는 데 유용한 핵심 노드로 간주됩니다.

VAX1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Vax1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Vax1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Vax1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 VAX1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 VAX1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Vax1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• VAX1 기능에 중요한 Vax1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Vax1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• VAX1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 VAX1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Vax1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  VAX1 HDR 플라스미드 (m) 및 VAX1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Vax1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Vax1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.