Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UKHC Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402349-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UKHCO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UKHC (h) e o Plasmídeo Double Nickase UKHC (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KIF5B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UKHC Anticorpo (F-5): sc-133184
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UKHC Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402349-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UKHC Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402349-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KIF5B codifica a cadeia pesada da cinesina-1 expressa de forma ubíqua (UKHC), um motor dependente de microtúbulos que impulsiona o transporte anterógrado, acionado por ATP, de cargas membranosas, organelos e complexos proteicos ao longo de axónios e de outros tipos celulares polarizados. Por meio de interações com as cadeias leves da cinesina e com adaptadores de carga, a KIF5B coordena o tráfego intracelular, contribui para a dinâmica do fuso mitótico e apoia a manutenção da polaridade celular e da organização do citoesqueleto. Essas funções cruzam-se com vias que regulam o transporte neuronal, a distribuição mitocondrial e o tráfego vesicular em sistemas secretórios e endocíticos. Alterações na regulação da KIF5B ou rearranjos têm sido associadas a contextos de sinalização oncogénica e a fenótipos de tráfego perturbado relevantes para a biologia tumoral e a neurobiologia.
UKHC O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KIF5B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KIF5B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KIF5B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KIF5B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.