UDP-GlcDH Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-405002-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UDP-GlcDHO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase UDP-GlcDH (h) e o Plasmídeo Double Nickase UDP-GlcDH (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para UGDH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UDP-GlcDH Anticorpo (B-4): sc-137058
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UDP-GlcDH Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-405002-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
UDP-GlcDH Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-405002-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O UGDH humano codifica a UDP-glicose 6-desidrogenase (UDP-GlcDH), uma enzima citosólica que oxida a UDP-glicose em ácido UDP-glucurónico, um precursor central para a biossíntese de glicosaminoglicanos e proteoglicanos. Ao controlar a disponibilidade de ácido UDP-glucurónico, a UDP-GlcDH ajuda a regular a composição da matriz extracelular, a arquitetura do glicocálix e as interações célula–célula/célula–matriz que influenciam a adesão, a migração e a mecanotransdução. A atividade do UGDH interliga-se com o metabolismo dos hidratos de carbono e com vias de interconversão de nucleótidos-açúcar que sustentam programas de glicosilação durante o desenvolvimento e a remodelação tecidular. A desregulação da expressão de UGDH ou do fluxo através do ácido UDP-glucurónico pode alterar a produção de hialuronano e de GAGs sulfatados, associando este eixo a fibrose, sinalização inflamatória e reprogramação da matriz associada ao cancro em sistemas experimentais.
UDP-GlcDH O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus UGDH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de UGDH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função UGDH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com UGDH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.