Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UDP-GlcDH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423601
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UDP-GlcDH O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UDP-GlcDH, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UDP-GlcDH Anticorpo (B-4): sc-137058
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UDP-GlcDH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423601 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Ugdh de camundongo codifica a UDP-glicose 6-desidrogenase (UDP-GlcDH), uma enzima citosólica que oxida UDP-glicose a ácido UDP-glicurônico, um precursor-chave para a biossíntese de glicosaminoglicanos e proteoglicanos. Essa reação sustenta a montagem e o remodelamento da matriz extracelular ao fornecer substratos para a produção de hialuronano e de sulfatos de condroitina/dermatana, influenciando a adesão celular, a migração e a morfogênese tecidual. A atividade de Ugdh também conecta o metabolismo de carboidratos às vias de interconversão de UDP-açúcares que moldam a composição do glicocálix e a sinalização célula–célula. A desregulação da disponibilidade de ácido UDP-glicurônico e da glicosilação da matriz tem sido associada, em modelos experimentais, a programas de desenvolvimento alterados, mudanças na matriz semelhantes à fibrose e fenótipos de invasão associados ao câncer.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UDP-GlcDH (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Ugdh em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Ugdh, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Ugdh na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UDP-GlcDH.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Ugdh para a investigação da sinalização de UDP-GlcDH, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Ugdh críticos para a função UDP-GlcDH
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Ugdh para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UDP-GlcDH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UDP-GlcDH Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Ugdh. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UDP-GlcDH Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UDP-GlcDH (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Ugdh para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Ugdh definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.