Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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UCK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423608
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- UCK1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico UCK1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:UCK1 Anticorpo (E-9): sc-373940
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
UCK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423608 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Uck1 codifica a uridina-citidina quinase 1 (UCK1), uma enzima citosólica da via de reaproveitamento (salvage) que fosforila uridina e citidina a UMP e CMP, fornecendo nucleotídeos de pirimidina para a síntese de RNA, a replicação do DNA e o metabolismo de fosfolipídios de membrana. Ao regular o equilíbrio dos pools de nucleotídeos, a UCK1 influencia a capacidade proliferativa, a progressão do ciclo celular e respostas ao estresse associadas à demanda de replicação e transcrição. Em sistemas murinos, a atividade de UCK1 é frequentemente analisada em conjunto com a síntese de novo de pirimidinas e o transporte de nucleosídeos para compreender a reprogramação metabólica e o fluxo compensatório na homeostase de nucleotídeos. Alterações no metabolismo de pirimidinas são uma característica recorrente de distúrbios que envolvem proliferação desregulada e manutenção do genoma, tornando Uck1 um ponto útil para estudos mecanísticos focados em vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO UCK1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Uck1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Uck1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Uck1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína UCK1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Uck1 para a investigação da sinalização de UCK1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Uck1 críticos para a função UCK1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Uck1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo UCK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo UCK1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Uck1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo UCK1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR UCK1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Uck1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Uck1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.