TSSK 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423532
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TSSK 2 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TSSK 2, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TSSK 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423532 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Tssk2 de camundongo codifica a quinase serina/treonina 2 específica de testículo (TSSK2), uma quinase enriquecida em células germinativas implicada na diferenciação pós-meiótica de espermátides e nos eventos de remodelação molecular necessários para a maturação dos espermatozoides. As quinases da família TSSK estão associadas ao controle, dependente de fosforilação, de programas de espermiogênese, incluindo reorganização da cromatina, dinâmica do citoesqueleto e montagem de estruturas flagelares. A interrupção da sinalização de TSSK tem sido relacionada a defeitos de fertilidade masculina e a função espermática anormal em modelos experimentais, tornando a TSSK2 um ponto útil para o estudo da biologia reprodutiva. Como quinase restrita ao testículo, a TSSK2 também serve como modelo para dissecar redes de quinases específicas de tecido e a proteostase durante o desenvolvimento tardio de células germinativas.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TSSK 2 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tssk2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tssk2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tssk2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TSSK 2.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tssk2 para a investigação da sinalização de TSSK 2, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tssk2 críticos para a função TSSK 2
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tssk2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TSSK 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TSSK 2 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tssk2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TSSK 2 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TSSK 2 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tssk2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tssk2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.