TSPAN7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423425

Visão geral

Tspan7 codifica a proteína tetraspanina TSPAN7, um andaime de membrana multipasso que organiza microdomínios enriquecidos em tetraspaninas e modula a distribuição e a sinalização de receptores parceiros na superfície celular. Em camundongos, a TSPAN7 está implicada no tráfego de membranas, na remodelação do citoesqueleto e em processos de comunicação célula–célula que influenciam o desenvolvimento neuronal e a organização sináptica, podendo também afetar programas de adesão e motilidade em outros tipos celulares. Por meio de interações que moldam o agrupamento de receptores e a sinalização a jusante, a TSPAN7 contribui para vias ligadas à endocitose, à dinâmica da actina e à transdução de sinais em compartimentos de membrana especializados. A desregulação da função da rede de tetraspaninas tem sido associada a fenótipos do neurodesenvolvimento e a conectividade celular alterada, tornando Tspan7 um locus útil para estudos mecanísticos da biologia de microdomínios de membrana.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TSPAN7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tspan7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tspan7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tspan7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TSPAN7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tspan7 para a investigação da sinalização de TSPAN7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tspan7 críticos para a função TSPAN7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tspan7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TSPAN7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TSPAN7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tspan7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TSPAN7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TSPAN7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tspan7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tspan7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.