TSPAN18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-405937

概要

TSPAN18はテトラスパニンファミリーに属する膜タンパク質をコードしており、テトラスパニン富化マイクロドメインの編成を助けることで、形質膜上における受容体・接着分子・シグナル伝達アダプター間の側方相互作用を協調的に制御します。こうした足場（スキャフォールド）機能を通じて、TSPAN18は細胞間コミュニケーション、膜輸送、シグナル統合といったプロセスに影響し、細胞の活性化や運動性プログラムの形成に関与し得ます。TSPAN18を含むテトラスパニンの発現や遺伝的多型は、文献において血小板関連の表現型および血管生物学との関連が報告されており、止血関連シグナルや炎症応答の研究における標的としての有用性を支持します。TSPAN18の機能を解析することで、膜マイクロドメインの構成が心血管系および免疫関連疾患の機序に関わる下流経路をどのように調節するかを明らかにできます。

TSPAN18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTSPAN18遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TSPAN18内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TSPAN18のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TSPAN18タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TSPAN18シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TSPAN18欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TSPAN18の機能に不可欠なTSPAN18エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TSPAN18ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TSPAN18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTSPAN18 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TSPAN18遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TSPAN18 HDRプラスミド（h）および TSPAN18 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTSPAN18ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTSPAN18標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。