Partículas Lentivirales de Activación (h) Trk C: sc-400854-LAC

NTRK3 codifica el receptor tirosina cinasa Trk C, un receptor de alta afinidad para la neurotrofina-3 que regula la supervivencia neuronal, la diferenciación, la guía axonal y la plasticidad sináptica. Tras la unión del ligando y la autofosforilación, Trk C activa cascadas de señalización canónicas, como MAPK/ERK, PI3K–AKT y PLCγ–PKC, coordinando programas transcripcionales y la dinámica del citoesqueleto. La actividad de NTRK3 influye en procesos del neurodesarrollo y en el mantenimiento de los circuitos neuronales, y la desregulación de la señalización de la familia Trk se ha implicado en contextos como la reconfiguración de vías oncogénicas y la alteración de la función neuronal. Como nodo de vía que integra señales tróficas con redes de cinasas aguas abajo, NTRK3 se estudia ampliamente en modelos de especificación de linaje neural, transducción de señales y perturbaciones de señalización asociadas a enfermedad.

Las partículas de activación lentiviral Trk C (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de NTRK3 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Trk C (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción NTRK3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Trk C. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo NTRK3 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.