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TREML2CRISPR激活质粒(m) | sc-435918-ACT | 20 µg | $397.00 |
Treml2 编码髓系细胞触发受体样蛋白 2(triggering receptor expressed on myeloid cells-like 2,TREML2),这是一种 I 型膜受体,在髓系谱系细胞中富集表达,并参与先天免疫感知与炎症信号传导。研究表明,TREML2 可调控小胶质细胞和巨噬细胞的激活状态,进而影响细胞因子产生、吞噬反应以及与适应性免疫的相互沟通。通过这些过程,Treml2 常被用于研究神经炎症与组织驻留髓系细胞稳态相关通路,并与神经退行性疾病、自身免疫性炎症及感染等模型具有相关性。其细胞表面定位及情境依赖性的表达特征,使其成为在小鼠体系中解析受体介导免疫调控机制的一个重要节点。
TREML2 CRISPR激活质粒(m)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性Treml2的表达。
TREML2 CRISPR激活质粒(m)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的Treml2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于Treml2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TREML2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的Treml2位点,并能够研究内源性位点上依赖于TREML2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在Treml2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TREML2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。