Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TRAP150 Plasmide Double Nickase (m): sc-432980-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- TRAP150 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il TRAP150 Double Nickase Plasmid (m) e il TRAP150 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Thrap3. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: TRAP150 Antibody (F-10): sc-133250
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
TRAP150 Plasmide Double Nickase (m) | sc-432980-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TRAP150 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-432980-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Thrap3 codifica TRAP150, un fattore nucleare legante l’RNA e associato alla trascrizione, implicato nell’accoppiamento tra trascrizione e splicing del pre‑mRNA e nella processazione dell’estremità 3′. TRAP150 partecipa alla maturazione degli mRNP e interagisce con componenti dello spliceosoma e della macchina trascrizionale, influenzando le decisioni di splicing alternativo e i programmi di espressione genica. Queste funzioni collegano Thrap3 alla regolazione della progressione del ciclo cellulare e a reti trascrizionali responsivo‑allo‑stress, frequentemente alterate nella biologia del cancro. Le alterazioni dello splicing e del coordinamento trascrizionale associate all’attività di TRAP150 rendono questo gene rilevante per studiare i meccanismi alla base dell’espressione genica oncogenica e dei difetti di processamento dell’RNA.
TRAP150 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Thrap3 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Thrap3. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Thrap3. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Thrap3 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.