Plasmide Double Nickase (h) TRAF2: sc-400361-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) TRAF2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide TRAF2 Double Nickase (h) et le plasmide TRAF2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant TRAF2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: TRAF2 Antibody (F-2): sc-136999
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) TRAF2 | sc-400361-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) TRAF2 | sc-400361-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
TRAF2 (facteur associé au récepteur du TNF 2) est une protéine adaptatrice et une ligase E3 de l’ubiquitine qui couple la signalisation de la superfamille des récepteurs du TNF aux voies transcriptionnelles et de réponse au stress en aval. Grâce à ses interactions avec des motifs de liaison aux TRAF et à la régulation de l’ubiquitination liée à K63, TRAF2 contribue à coordonner l’activation des cascades NF-κB et MAPK, modulant les réponses cytokiniques, la résistance à l’apoptose et l’homéostasie cellulaire. Son activité s’interface avec des complexes de signalisation dépendants de RIPK1 et influence le dialogue entre la signalisation inflammatoire et les programmes de mort cellulaire. Une signalisation TRAF2 dérégulée a été impliquée dans une régulation immunitaire altérée et le remodelage de voies oncogéniques, ce qui en fait un nœud utile pour des études mécanistiques de phénotypes associés à l’inflammation.
TRAF2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus TRAF2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de TRAF2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de TRAF2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de TRAF2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.