Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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TR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423490
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TR4 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico TR4, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TR4 Anticorpo (D-5): sc-365895
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423490 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Nr2c2 codifica o receptor nuclear órfão TR4 (receptor testicular 4), um fator de transcrição independente de ligante que se liga a elementos de resposta hormonal para regular programas gênicos envolvidos em desenvolvimento, metabolismo e decisões de destino celular. Em sistemas murinos, o TR4 se integra a redes de sinalização de receptores nucleares e influencia o controle transcricional da homeostase de lipídios e glicose, da função mitocondrial e de processos de diferenciação em contextos reprodutivos, neurais e relacionados ao sistema imune. A atividade do TR4 tem sido associada à modulação da sinalização inflamatória e das respostas ao estresse celular por meio de efeitos transcricionais amplos, tornando o Nr2c2 um nó útil para estudar a comunicação cruzada entre vias. A desregulação da expressão gênica associada ao TR4 tem sido investigada em modelos de disfunção metabólica, neurobiologia e fenótipos oncogênicos, apoiando sua relevância para pesquisa mecanística sem implicar desfechos clínicos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TR4 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Nr2c2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Nr2c2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Nr2c2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TR4.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Nr2c2 para a investigação da sinalização de TR4, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Nr2c2 críticos para a função TR4
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Nr2c2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo TR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TR4 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Nr2c2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo TR4 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TR4 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Nr2c2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Nr2c2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.