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TP53INP1慢病毒激活颗粒(h) | sc-402835-LAC | 200 µl | $455.00 |
TP53INP1(肿瘤蛋白 p53 诱导型核蛋白 1)是一种应激诱导的调控因子,能够将 p53 依赖的转录程序与细胞对 DNA 损伤、氧化应激以及营养匮乏的反应整合起来。TP53INP1 蛋白参与细胞周期检查点、细胞凋亡和自噬的调控,其中部分作用通过与 p53 信号以及 MAPK/JNK 相关通路的串扰来实现,从而塑造细胞的应激适应。已有研究在多种癌症背景中报道了 TP53INP1 表达的改变;同时它也与炎症和代谢表型相关,因此可作为解析“应激信号如何影响细胞命运决定”的关键节点。这些功能使 TP53INP1 成为研究转录应激网络及其下游通路重塑的一个机制性读出指标。
TP53INP1 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 TP53INP1 表达。
TP53INP1 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在TP53INP1转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性TP53INP1表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 TP53INP1 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。