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TP53INP1CRISPR激活质粒(h) | sc-402835-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
TP53INP1CRISPR激活质粒(h2) | sc-402835-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
TP53INP1(肿瘤蛋白 p53 诱导核蛋白 1)是一种应激反应性核蛋白,在 DNA 损伤和氧化应激条件下由 p53 及相关转录程序诱导表达。它通过相互作用调控细胞周期控制、细胞凋亡和自噬,从而影响 p53 依赖的转录输出以及更广泛的应激适应网络。TP53INP1 表达异常与应激信号、增殖与存活通路的失调有关,而这些通路在肿瘤生物学和炎症相关情境中常常发生紊乱。作为细胞应激反应的枢纽调控因子,TP53INP1 常被用于研究其在基因毒性条件下对检查点调控、线粒体完整性以及转录重编程的影响。
TP53INP1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性TP53INP1的表达。
TP53INP1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的TP53INP1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于TP53INP1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性TP53INP1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的TP53INP1位点,并能够研究内源性位点上依赖于TP53INP1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在TP53INP1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟TP53INP1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。