TMEM134 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406513

概要

TMEM134は膜貫通タンパク質134をコードしており、複数回膜貫通型の膜タンパク質であると予測されています。細胞内の膜系コンパートメントに局在し、膜の構造化や輸送（トラフィッキング）に寄与すると考えられています。分子パートナーはまだ十分に同定されていないものの、TMEM134はタンパク質のソーティング、受容体のターンオーバー、ストレス応答性シグナル伝達など、エンドメンブレン動態に依存する過程と関連づけられてきました。複数の疾患文脈におけるトランスクリプトーム研究ではTMEM134の発現パターンの変化が報告されており、細胞恒常性に関わる経路の候補調節因子としての位置づけを支持しています。そのため、TMEM134の機能解析は、ヒト細胞モデルにおいてシグナル出力、増殖、生存を調節する膜関連機構を解明するうえで有用です。

TMEM134 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMEM134遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMEM134内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMEM134のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMEM134タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMEM134シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMEM134欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMEM134の機能に不可欠なTMEM134エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMEM134ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMEM134 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMEM134 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMEM134遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMEM134 HDRプラスミド（h）および TMEM134 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMEM134ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMEM134標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。