TMEM132C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-431553

Visão geral

Tmem132c codifica a TMEM132C, uma proteína transmembranar multipasso prevista, que se localiza em membranas celulares e acredita-se que contribua para a organização da superfície celular e para a sinalização associada à membrana. Membros da família TMEM132 têm sido associados à regulação da adesão celular e da dinâmica do citoesqueleto, sugerindo papéis na arquitetura tecidual e na homeostase neuronal ou epitelial. Em sistemas murinos, os padrões de expressão de Tmem132c sustentam a investigação de como proteínas de membrana modulam a conectividade celular e as respostas ao estresse no desenvolvimento e na fisiologia adulta. A desregulação de módulos transmembranares de adesão/sinalização é comumente explorada em estudos de neurobiologia e genética de doenças complexas, tornando a TMEM132C um alvo útil para a investigação mecanística de vias.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO TMEM132C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tmem132c em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tmem132c, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tmem132c na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína TMEM132C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tmem132c para a investigação da sinalização de TMEM132C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tmem132c críticos para a função TMEM132C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tmem132c para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo TMEM132C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo TMEM132C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tmem132c. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo TMEM132C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR TMEM132C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tmem132c para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tmem132c definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.