TMEM126A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406768

概要

TMEM126Aは、呼吸鎖の生物学および酸化的リン酸化能の維持に関与するとされる、ミトコンドリア関連の膜貫通タンパク質をコードしています。研究により、TMEM126Aはミトコンドリア複合体Iに関連するプロセスと結び付けられており、細胞のレドックスバランス、ATP産生、代謝ストレスに対する感受性に影響を与えることが示されています。TMEM126Aの機能変化は、常染色体劣性遺伝の視神経萎縮などの神経眼科的所見を含むミトコンドリア機能障害の表現型と関連づけられており、ヒト細胞における生体エネルギー脆弱性を検討する上で重要です。したがってTMEM126Aは、ミトコンドリアの品質管理、ストレス適応シグナル伝達、ならびに細胞の生存や分化プログラムへの下流影響を調べるための有用な標的となります。

TMEM126A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTMEM126A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TMEM126A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TMEM126Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TMEM126Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TMEM126Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TMEM126A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TMEM126Aの機能に不可欠なTMEM126Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TMEM126Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TMEM126A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTMEM126A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TMEM126A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TMEM126A HDRプラスミド（h）および TMEM126A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTMEM126Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTMEM126A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。