TM4SF19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-406884

概要

TM4SF19（transmembrane 4 L six family member 19）は、膜マイクロドメインの構築を担い、細胞—細胞間あるいは細胞—細胞外マトリックス間の相互作用を調節すると予測される、テトラスパン様の膜タンパク質をコードします。TM4SFファミリーの一員として、TM4SF19は受容体のクラスター形成、形質膜におけるシグナル伝達、ならびに遊走や上皮組織化に影響する接着関連経路の制御などの過程に関与すると考えられています。TM4SFタンパク質の発現変動は複数のがんの文脈で報告されており、腫瘍生物学、浸潤表現型、微小環境シグナル伝達におけるTM4SF19の役割を検討する意義が示唆されています。さらに、TM4SF19の機能撹乱（perturbation）研究は、ヒト細胞における膜タンパク質輸送や、細胞表面プロテオーム（surfaceome）の組成に関する機序の理解にも寄与します。

TM4SF19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるTM4SF19遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、TM4SF19内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、TM4SF19のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、TM4SF19タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、TM4SF19シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、TM4SF19欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• TM4SF19の機能に不可欠なTM4SF19エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、TM4SF19ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• TM4SF19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびTM4SF19 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、TM4SF19遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  TM4SF19 HDRプラスミド（h）および TM4SF19 HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはTM4SF19ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のTM4SF19標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。