非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
血栓软蛋白 5 抗体 (F-7): sc-374660. 未转染: sc-117752 (A) 和转染: sc-115080 (B) 293T 全细胞裂解液中血栓软蛋白 5 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
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Thrombospondin 5 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-402797
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Thrombospondin 5 CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在Thrombospondin 5基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Thrombospondin 5: sc-374660，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Thrombospondin 5 CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-402797 | 20 µg | $397.00 |
概述
COMP 编码血小板反应蛋白 5（thrombospondin 5），这是一种五聚体的细胞外基质糖蛋白，在软骨和肌腱中高度富集，支持基质装配与组织生物力学功能。血小板反应蛋白 5 可与胶原蛋白、蛋白聚糖以及细胞表面受体相互作用，从而调控软骨细胞黏附、力学信号转导以及细胞外基质的组织结构。它通过影响胶原原纤维形成（fibrillogenesis）和基质周转通路来维持软骨稳态，这些过程共同塑造骨骼发育与关节完整性。COMP 功能失调及基质沉积异常与遗传性骨骼发育不良和退行性软骨表型相关，因此是研究肌肉骨骼细胞外基质生物学的一个有价值的关键节点。
Thrombospondin 5 CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中COMP基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对COMP基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏COMP开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使Thrombospondin 5蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建COMP缺失的细胞模型，用于Thrombospondin 5信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 Thrombospondin 5 功能至关重要的 COMP 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 COMP 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 Thrombospondin 5 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 Thrombospondin 5 CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 COMP 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 Thrombospondin 5 HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 Thrombospondin 5 HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由COMP同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定COMP靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。