TGF beta Receptor 2/TGFBR2 Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-423371-NIC

O gene murino **Tgfbr2** codifica o Receptor 2 de TGF beta (TGFBR2), uma quinase transmembrana de serina/treonina que se liga a ligantes TGFB e fosforila o TGFBR1 para iniciar a sinalização canônica via SMAD2/3. Essa via coordena o controle dependente do contexto da regulação do ciclo celular, da diferenciação, da transição epitélio–mesênquima e da remodelação da matriz extracelular, além de integrar-se às vias de sinalização MAPK, PI3K–AKT e GTPases RHO. Em pesquisa biomédica, alterações na atividade do TGFBR2 são amplamente utilizadas para modelar desregulação da homeostase tecidual, modulação imune e remodelamento fibrótico, bem como o redirecionamento de vias observado na biologia do câncer e em fenótipos do desenvolvimento. Como o TGFBR2 está no topo da transdução do sinal de TGFB, perturbar **Tgfbr2** oferece uma forma direta de dissecar programas transcricionais a jusante e circuitos de feedback dependentes de ligante.

TGF beta Receptor 2/TGFBR2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Tgfbr2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Tgfbr2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Tgfbr2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Tgfbr2 interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.