TFIIIC220 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404920-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- TFIIIC220O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase TFIIIC220 (h) e o Plasmídeo Double Nickase TFIIIC220 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GTF3C1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:TFIIIC220 Anticorpo (F-12): sc-398780
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
TFIIIC220 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404920-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
TFIIIC220 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404920-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GTF3C1 codifica a TFIIIC220, a maior subunidade do complexo TFIIIC, que reconhece elementos promotores internos em genes transcritos pela RNA polimerase III, incluindo tRNAs e outros pequenos RNAs não codificantes. Por meio da ligação ao promotor e do recrutamento de TFIIIB, a TFIIIC220 dá suporte à montagem do complexo de pré-iniciação da Pol III e regula a produção transcricional associada à capacidade de tradução, à adaptação ao estresse e à progressão do ciclo celular. O TFIIIC também contribui para a organização genômica de ordem superior ao se associar à cromatina e a elementos de fronteira, conectando a transcrição pela Pol III à arquitetura nuclear. A desregulação do controle transcricional da Pol III e da função do TFIIIC é frequentemente investigada em contextos de programas de proliferação alterados, estabilidade genômica e reprogramação transcricional observados em modelos de câncer e de doenças do desenvolvimento.
TFIIIC220 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GTF3C1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GTF3C1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GTF3C1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GTF3C1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.